ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)相關(guān)問(wèn)題的解答

1、問(wèn)：ELISA試劑盒做間接ELISA試劑盒法測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽(yáng)性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬(wàn)、10萬(wàn)、20萬(wàn)不等，用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過(guò)氧化物酶。可是結(jié)果除了空白對(duì)照孔沒有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么?

回答：可能原因如下：

(1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。

(2) 洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。

(3) 移液頭重復(fù)使用，未洗凈或xiao毒不完全; 防止辦法移液頭一定要一次性使用。

(4) 酶標(biāo)板靈敏度過(guò)高。

(5) 一抗顯色時(shí)間的控制等等，關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

2、ELISA試劑盒加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn)

(1)用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報(bào)紙，墊在下面，這樣，加過(guò)標(biāo)本的小孔看過(guò)去下面的字會(huì)變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。

(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別

(3)在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分

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以上是ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)相關(guān)問(wèn)題解答你知道了嗎？